使用所述试剂盒对犬腺bingduii型、犬细小bingdu、犬瘟热bingdu和犬副流感bingdu进行四重实时荧光定量pcr检测时,青山区好的细小病菌服务为先,将单一包装的阳性对照品混合或直接使用混合包装的阳性对照品。上述试剂盒中还包括标准品:cav-ii标准品、cpv标准品、cdv标准品和cpiv标准品;各标准品为单一包装或等浓度混合包装;使用所述试剂盒对犬腺bingduii型,青山区好的细小病菌服务为先、犬细小bingdu、犬瘟热bingdu和犬副流感bingdu进行四重实时荧光定量pcr检测时,将单一包装的标准品等浓度混合或直接使用混合包装的标准品。上述的引物和taqman探针组或上述的试剂盒在对犬腺bingduii型、犬细小bingdu、犬瘟热bingdu和犬副流感bingdu进行非疾病诊断目的的检测中的应用。上述的检测应用为用实时荧光定量pcr技术对犬腺bingduii型、犬细小bingdu、犬瘟热bingdu和犬副流感bingdu进行非疾病诊断目的的定性、定量检测方法,包括以下步骤:1)建立标准曲线:将cav-ii标准品、cpv标准品、cdv标准品和cpiv标准品等浓度混合,按照10倍梯度将混合液中各标准品浓度稀释至1×108,青山区好的细小病菌服务为先、1×107、1×106、1×105、1×104、1×103、1×102、1×101copies/μl;以不同浓度的标准品混合液作为模板。
其它样品未出现特定的“s”型扩增曲线,结果阴性。检测结果表明用本发明的方法可特异性地检测出cav-ii、cpv、cdv和cpiv。并且本发明提供的方法在特异性检测方面,能够检测的bingdu(细菌)种类较多。、灵敏度检测按照实施例2中的方法,将分别携带cav-ii、cpv、cdv和cpivbingdu目的基因的4个标准品(cav2标准品、cpv标准品、cdv标准品和cpiv标准品)等浓度混合,按照10倍梯度稀释至1×108、1×107、1×106、1×105、1×104、1×103、1×102、1×101copies/μl,以不同浓度的标准品混合液作为模板,在实施例1中的引物和taqman探针的引导下进行实时荧光定量pcr检测,pcr反应体系及反应条件参照实施例2,以验证该方法的灵敏度。检测结果如图5所示,可见,本发明提供的四重实时荧光定量pcr检测方法对cav-ii、cpv、cdv和cpiv均可以检测至1×103copies/μl,与其它普通pcr检测方法,例如:cdv、cpv、cav-2及cpiv多重pcr的建立及应用,刘畅等,《中国动物检疫》,2017年11期公开的×106、×106、×106和×106copies/μl相比,敏感度提高103倍;文献cna公开的×10-4ng/μl(大约105copies/μl)相比,敏感度提高近102倍,可见本发明的方法具有较高的敏感度。
临床上常用的处fang为生理盐水或5%~10%葡萄糖溶液20~50毫升/千克体重,氨苄青霉素5~10毫升/千克体重,强尔心~,维生素C100毫升/千克体重,维生素K35~10毫升/千克体重,**2~5毫克/次,混合一次静脉注射,每天1~2次,同时静脉注射5%碳酸氢钠注射液50毫升/千克体重,1~2次/天,爱茂尔1~4毫升,3~6次/天肌肉注射,维迪康,有较好的疗效。有饮欲的可给予足量的口服补液盐溶液,自由饮用,没有饮欲的可进行灌服,口服补液盐溶液的配方为:氯化钠,碳酸氢钠,氯化钾,葡萄糖20克,水1000毫升。为了补充营养,可静脉注射25%~50%葡萄糖溶液、氨基酸或代血浆和白蛋白等。可大剂量应用**和山莨菪碱(654-2)溶液进行静脉或肌肉注射。为尽**出肠道内容物,可进行灌肠。一般用~,或者先用口服补液盐溶液进行灌肠,末了再用口服液盐溶液加kangjun药或抗bingdu药进行保留灌肠,也可用生理盐水、复方生理盐水、乳酸林格尔氏液灌肠。市场上有犬细小bingdu病高免血清,可以试用。据资料报道,早期使用,并配合对症治聊,有较好的疗效。但在其后期使用,意义不大。在治聊时,也可试用犬用干扰素、犬用bingdu灵。
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